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Electroforesis de proteínas y

Western Blot

El Western Blot es una técnica muy poderosa que proporciona información valiosa que no se puede obtener fácilmente de otras técnicas de laboratorio. Por esta razón es utilizada para el análisis, caracterización y semi-cuantificación de proteínas en una mezcla que puede ser muy compleja. Esta técnica contempla múltiples pasos involucrados, por lo que es importante conocer a detalle cada uno de estos, con el fin de obtener resultados exitosos y con esto poder optimizar los recursos en las diferentes etapas del proceso, ajustándola a determinados ensayos o necesidades experimentales.

En este curso aplicaras los conocimientos para la identificación especifica de proteínas mediante el uso del Western Blot, lo cual permite la realización adecuada y optimización de esta técnica en función a sus requerimientos experimentales.

Curso teórico y práctico.

Modalidad: Semipresencial.

Sesiones online
Fechas:
21, 22, 28 y 29 de mayo de 2022. 
Horario: 9:00 AM a 11:30 AM.
Sesión práctica
Fecha: 5 de junio de 2022.
Horario: 9:00 AM a 2:00 PM.

Se recomienda: Conocimientos básicos en Biología Celular, Biología Molecular, Química y Bioquímica

Capacitador: M. en C. Diana Guadalupe Meza Aguilar.

Candidata a doctor en Biología molecular por el CINVESTAV-IPN.

Contenido del curso

1. Western Blot: Visión General
   1.1. Conceptos básicos sobre Western Blot
   1.2. Aplicaciones del Western Blot
   1.3. Etapas del Western Blot
   1.4. Ventajas y desventajas de la técnica

2. Lisis Celular y extracción de proteínas
   2.1. Extracción de proteínas de una muestra
   2.2. Determinación de la concentración de proteínas
   2.3. Preparación de las muestras para cargar un gel

3. Electroforesis
   3.1. Fundamentos de la electroforesis
   3.2. Geles de poliacrilamida
   3.3. Concentración de gel
   3.4. Marcadores de peso molecular

4. Transferencia de proteínas a membranas
   4.1. Tipos de membranas
   4.2. Tipos de transferencia
   4.3. Tinción de membrana

 

5. Métodos de bloqueo
   5.1. Bloqueo de sitios específicos
   5.2. Soluciones de bloqueo

6. Inmunodetección I
   6.1 Anticuerpos
   6.2 Elección de anticuerpos primarios
   6.3 Hibridación de anticuerpo-proteína

7. Inmunodetección II
   7.1 Elección de anticuerpos secundarios
   7.2 Hibridación anticuerpo – anticuerpo

 

8. Sistemas de detección de proteínas
   8.1 Quimioluminiscencia
   8.2 Fluorescencia
   8.3 Importancia de los controles
   8.4 Obtención de imágenes (membrana húmeda y membrana seca)


9. Resolución de problemas
   9.1 Bandas múltiples
   9.2 Ausencia de bandas
   9.3 Manchas blancas
   9.4 Bandas fantasmas

 

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