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Electroforesis de proteínas y Western Blot

Información

El Western Blot es una técnica muy poderosa que proporciona información valiosa que no se puede obtener fácilmente de otras técnicas de laboratorio. Por esta razón es utilizada para el análisis, caracterización y semi-cuantificación de proteínas en una mezcla que puede ser muy compleja. Esta técnica contempla múltiples pasos involucrados, por lo que es importante conocer a detalle cada uno de estos, con el fin de obtener resultados exitosos y con esto poder optimizar los recursos en las diferentes etapas del proceso, ajustándola a determinados ensayos o necesidades experimentales.

En este curso aplicaras los conocimientos para la identificación especifica de proteínas mediante el uso del Western Blot, lo cual permite la realización adecuada y optimización de esta técnica en función a sus requerimientos experimentales.

Curso dirigido a: Alumnos de licenciatura, posgrados; personal en formación y/o profesionales en el campo de la investigación, biología, química, medicina y relacionados, con el interés en conocer o profundizar en la técnica del Western Blot.   

Curso: Teórico/practico

Modalidad: Online

Número de horas / días por semana: 15 horas / 5 días


Fechas: 21, 22, 23, 29 y 30 de mayo de 2021


Horario: viernes 5:00 PM a 8:00 PM, sábados y domingos de 10:00 AM a 1:00 PM. Horario de la Ciudad de México.

Se recomienda: Conocimientos básicos en Biología Celular, Biología Molecular, Química y Bioquímica.

 

Capacitador: M. en C. Diana Guadalupe Meza Aguilar. Candidata a doctor en Biología molecular por el CINVESTAV-IPN.

Contenido del curso

1. Western Blot: Visión General
   1.1. Conceptos básicos sobre Western Blot
   1.2. Aplicaciones del Western Blot
   1.3. Etapas del Western Blot
   1.4. Ventajas y desventajas de la técnica

2. Lisis Celular y extracción de proteínas
   2.1. Extracción de proteínas de una muestra
   2.2. Determinación de la concentración de proteínas
   2.3. Preparación de las muestras para cargar un gel

3. Electroforesis
   3.1. Fundamentos de la electroforesis
   3.2. Geles de poliacrilamida
   3.3. Concentración de gel
   3.4. Marcadores de peso molecular

4. Transferencia de proteínas a membranas
   4.1. Tipos de membranas
   4.2. Tipos de transferencia
   4.3. Tinción de membrana

 

5. Métodos de bloqueo
   5.1. Bloqueo de sitios específicos
   5.2. Soluciones de bloqueo

6. Inmunodetección 
   6.1. Anticuerpos primarios 
      6.1.1. Elección de anticuerpos primarios
      6.1.2. Hibridación de anticuerpo-proteína
   6.2. Anticuerpos secundarios 
      6.2.1. Hibridación anticuerpo - anticuerpo

7. Sistemas de detección de proteínas
   7.1. Quimioluminiscencia
   7.2. Fluorescencia
   7.3. Importancia de los controles 
   7.4. Obtención de imágenes (membrana húmeda y membrana seca)

8. Resolución de problemas
   8.1. Bandas múltiples
   8.2. Ausencia de bandas
   8.3. Manchas blancas
   8.4. Bandas fantasmas

 

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