PCR: historia y fundamentos

Información

La reacción en cadena de la polimerasa (PCR, por sus siglas en inglés) es una técnica de biología molecular empleada para amplificar regiones específicas del DNA. Fue descrita por primera vez a mediados de los 80’s por Kary Mullis y en los últimos 30 años se han desarrollado mejoras significativas que han ampliado su aplicación y eficacia.


Actualmente, la PCR ha sido aplicada con éxito en el campo de la medicina, tanto como prueba diagnóstica como para evaluar la evolución de las enfermedades (infecciosas y/o hereditarias). Debido a esto, es necesario conocer la historia, usos y aplicaciones de la PCR. 

 

Curso dirigido a Químicos, Biólogos, Bioquímicos, Biomédicos, Médicos, Biotecnólogos o áreas relacionadas.

  • Curso virtual.

  • Horas totales / sesiones : 12 horas / 4 sesiones.

  • Fechas próximas: 7, 8, 14 y 15 agosto del 2021.

  • Horario: 8:00 AM a 11:00 AM (Hora CDMX).

  • Conocimientos mínimos: Química, bioquímica, biología celular, biología molecular.

  • Materiales requeridos: Computadora con acceso a internet.

  • Plataforma: Google Meet. Grabación de las sesiones en vivo.

  • Capacitador: Enrique Ambrocio-Ortiz. Químico Farmacéutico Biológico, UAM Xochimilco. M. en C. de la Salud, IPN. Escuela Superior de Medicina.
    Estudiante del doctorado en Ciencias Biológicas y de la Salud, UAM Xochimilco.

Contenido del curso

1. Introducción
   1.1 ¿Qué es la PCR?: Antecedentes de la metodología
   1.2 Principio biológico de la PCR
      1.2.1 Dogma central de la biología molecular
         1.2.1.1 Replicación
         1.2.1.2 Transcripción 
         1.2.1.3 Traducción
   1.3 Fundamento de la PCR
      1.3.1 Buffer
      1.3.2 Primers o cebadores
      1.3.3 Polimerasa
      1.3.4 dNTPs
      1.3.5 Cofactores
      1.3.6 Templado de DNA
      1.3.7 Sondas
      1.3.8 Termociclador
   1.4 Mecanismo de la PCR

2. Tipos de PCR
   2.1 PCR de punto final
   2.2 PCR de tiempo real (qPCR)
   2.3 Amplified fragment length polymorphism (AFLP) PCR
   2.4 Allele-specific (AS) PCR
   2.5 ALU PCR
   2.6 Assambly PCR
   2.7 Assymetric PCR
   2.8 COLD-PCR
   2.9 Colony PCR
   2.10 Digital PCR

   2.11 Fast cycling PCR   

   2.12 High fidelity PCR   

   2.13 High resolution melt (HRM) PCR   

   2.14 Hot Start PCR 

   2.15 PCR in situ   

   2.16 PCR y enzimas de restricción

   2.17 InterSequence-Specific PCR (ISSR-PCR)       2.18 Inverse PCR

   2.19 LATE-PCR
   2.20 Ligation-mediated PCR
   2.21 Long range PCR
   2.22 Methylation-specific PCR (MSP)
   2.23 Miniprimer PCR
   2.24 PCR múltiple
   2.25 Nanoparticle-Assisted PCR (nanoPCR)
   2.26 PCR anidada
   2.27 Overlap extension PCR
   2.28 Repetitive sequence-based PCR
   2.29 Reverse-Transcriptase
   2.30 RNase H-dependent PCR (rhPCR)
   2.31 Single Specific Primer-PCR (SSP-PCR)
   2.32 Solid phase PCR
   2.33 Suicide PCR
   2.34 Thermal asymmetric interlaced PCR (TAIL-PCR)
   2.35 Touch down (TD) PCR
   2.36 Variable Number of Tandem Repeats (VNTR) PCR

3. Aplicaciones de la PCR-Diseño de primers
   3.1 Introducción
      3.1.1 Características
      3.1.2 Consideraciones
   3.2 Diseño de primers usando plataformas gratuitas
      3.2.1 Uso de la plataforma NCBI para el diseño de sondas
   3.3 Ejercicios 

4. Ensayos en tiempo real y análisis de datos
   4.1 PCR en tiempo real y aplicaciones
      4.1.1 Ensayos de expresión génica
      4.1.2 Uso de qPCR como método diagnóstico
      4.1.3 Genotipificación por qPCR

 

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