PCR: historia y fundamentos

Información

La reacción en cadena de la polimerasa (PCR, por sus siglas en inglés) es una técnica de biología molecular empleada para amplificar regiones específicas del DNA. Fue descrita por primera vez a mediados de los 80’s por Kary Mullis y en los últimos 30 años se han desarrollado mejoras significativas que han ampliado su aplicación y eficacia.


Actualmente, la PCR ha sido aplicada con éxito en el campo de la medicina, tanto como prueba diagnóstica como para evaluar la evolución de las enfermedades (infecciosas y/o hereditarias). Debido a esto, es necesario conocer la historia, usos y aplicaciones de la PCR. 

 

Curso dirigido a: Químicos, biólogos, bioquímicos, biomédicos, médicos, biotecnólogos o conocimientos básicos del área.

  • Curso online.

  • Duración: 14 horas / 4 sesiones.

  • Fechas próximas: 5, 6, 11 y 12 de junio del 2021.

  • Horario: 5 y 6 de 8:00 AM a 12:00 PM, viernes 11 de 5:00 PM a 8:00 PM y sábado 12 de 8:00 AM a 11:00 AM.

  • Conocimientos mínimos: Química, bioquímica, biología celular, biología molecular.

  • Materiales requeridos: Computadora con acceso a internet.

  • Plataforma: Google Meet. Grabación de las sesiones en vivo.

  • Capacitador: Enrique Ambrocio-Ortiz. Químico Farmacéutico Biológico, UAM Xochimilco. M. en C. de la Salud, IPN. Escuela Superior de Medicina.
    Estudiante del doctorado en Ciencias Biológicas y de la Salud, UAM Xochimilco.

Contenido del curso

1. Introducción
   1.1. ¿Qué es la PCR?: Antecedentes de la metodología
   1.2. Fundamento de la PCR
      1.2.1. Polimerasas
      1.2.2. Primers o cebadores
      1.2.3. dNTPs
      1.2.4. Cofactores
   1.3. Mecanismo de la PCR

 

2. Tipos de PCR
   2.1. PCR de punto final
   2.2. PCR múltiple
   2.3. PCR y enzimas de restricción
   2.4. PCR de tiempo real (qPCR)
      2.4.1. Ventajas
      2.4.2. Sondas
      2.4.3. Problemas más comunes
   2.5. PCR in situ
   2.6. Long PCR
   2.7. Aplicaciones de la PCR
      2.7.1. Detección de polimorfismos
      2.7.2. Detección de mutaciones
      2.7.3. Cuantificación de mRNA
      2.7.4. Carga viral
      2.7.5. Pruebas diagnostica

   2.8. Consideraciones y problemas comunes
      2.8.1. Productos de amplificación inespecíficos
      2.8.2. No amplificación
      2.8.3. Generación de múltiples señales
      2.8.4. Calidad del DNA
      2.8.5. Contaminantes de la reacción
 

3. Interpretación de resultados
   3.1. Ensayos de Genotipifícación
   3.2. Ensayos de metilación
   3.3. Ensayos de expresión
   3.4. Curvas de disociación

 

4. Simulador para la elaboración de PCR
 

5. Elaboración de primers y sondas
   5.1. Herramientas gratuitas para el diseño de primers
      5.1.1. Uso de la plataforma NCBI para el diseño de sondas
      5.1.2. Pick primer y uso de secuencias para la elaboración de primers
      5.1.3. Parámetros críticos en el diseño de primers
     5.1.4. Interpretación de los diseños propuestos
   5.2. Ejercicio: Elaboración de sonda y primers

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