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Clonación molecular

Información

En la actualidad se han identificado una gran variedad de genes que codifican para distintas proteínas cuya función es clave en distintos procesos celulares. Sin embargo, en la mayoría de los casos se desconocen los mecanismos por los cuales es posible inducir o reprimir la expresión de dichos genes.

 

En este curso se aprenderán distintos métodos bioinformáticos y experimentales para la clonación molecular de promotores génicos, con la finalidad de dilucidar el mecanismo de regulación de la expresión génica mediada por factores de transcripción que inciden sobre promotores de genes específicos. La caracterización de dichos mecanismos es fundamental en la identificación de blancos moleculares y terapéuticos importantes en distintas patologías.

  • Curso online.

  • Duración: 12 horas / 4 sesiones.

  • Fechas próximas: 24, 25, 31 de julio y 1 de agosto.

  • Horario: sábados de 9:00-12:00 horas y domingos de 10:00-12:00 horas.

  • Conocimientos mínimos: química analítica y fisicoquímica.

  • Materiales requeridos: Computadora con acceso a internet.

  • Plataforma: Google Meet. Grabación de las sesiones en vivo.

  • Capacitador: M. en C. Fátima Elizabeth Murillo González.

Contenido del curso

1. Introducción
   1.1 Fundamentos de clonación molecular: ¿Qué podemos clonar? ¿Cómo podemos Clonar? ¿Para qué me sirve clonar?
   1.2 ¿Qué es la caracterización estructural y funcional de promotores génicos?
   1.3 Puntos clave en la evaluación de la expresión génica.
   1.4 Diseño de un estudio de Clonación Molecular.

2. Herramientas bioinformáticas para el análisis in silico de genes
   2.1 Selección del gen de interés.
   2.2 Búsqueda de secuencias génicas en bases de datos.
   2.3 Identificación estructural de promotores génicos.
   2.4 Análisis in silico de promotores: Predicción de elementos cis-reguladores a partir de bases de datos.
   2.5 Análisis filogenético de promotores génicos.

3. Diseño de primers
   3.1 Consideraciones generales para el diseño de primers
   3.2 Herramientas bioinformáticas para el diseño de primers. 
   3.3 Diseño de primers con sitios de restricción.

4. Clonación de promotores génicos
   4.1 Tipos de vectores de clonación.
   4.2 Aislamiento del promotor a partir de ADN genómico.
   4.3 Clonación mediante sitios de restricción.
   4.4 Clonación mediante topoisomerasa I: técnica de clonación TOPO.
   4.5 Formación de vectores recombinantes.
   4.6 Transformación bacteriana
   4.7 Aislamiento de ADN bacteriano: Mini-preps, midi-preps y maxi-preps.

5. Identificación del vector recombinante
   5.1 Identidad del plásmido mediante digestiones con enzimas de restricción
   5.2 Identidad del plásmido mediante secuenciación.

 

Trabajo de laboratorio

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